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色谱柱的使用寿命的影响因素

发布日期:2012-11-29      浏览次数:983
一、色谱柱筛板问题及对策
  
  色谱柱人口筛板堵塞是色谱柱zui常见的问题之一,筛板堵塞会导致柱压升高,色谱峰脱尾、塔板数降低。注射样品中含有微粒杂质,zui有可能堵塞色谱柱人口,降低柱寿命,故要在注样前,将样品过滤或离心;进样器与泵密封垫的磨损也会带来微粒,故可在进样阀与色谱柱之间用在线过滤器,常可避免色谱柱滤板堵塞问题。当筛板部分堵塞或进口处填料塌陷形成异常峰形时,可用强溶剂反冲色谱柱(低速)。如不见效,则需更换筛板,或重新填补填料后更换筛板。
  
二、强保留样品组份影响及控制
  
  强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上,能严重地缩短色谱柱寿命,在分析生物体液时尤为突出。这时,可在色谱柱加一保护柱,能够有效减少强吸附组分的污染。保护柱(预柱)是内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,可代替流路过滤器。保护柱的作用是吸附强保留组分,收集和阻塞化学垃圾进人分离柱,这些垃圾如果直接进人分离柱会逐渐堆积在柱头,zui终降低柱效能。保护柱是消耗品,如分析血浆样品,一般分析50个样品后需更换新柱芯。另外,每次分析结束后可用强溶剂冲洗分离柱(应卸下保护柱),以除去可能吸附在分离柱柱头的污物,有效延长色谱柱的使用寿命。
  
三、化学影响
  
  在分离过程中色谱柱固定相的流失会显著降低柱的使用寿命,应避免使用对固定相侵蚀性强的固定/流动相组合。短链硅烷基基团反相柱稳定性zui差在低pH条件下可很快流失有机相,而长链烷基反相柱(C18、CS)较稳定。


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