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LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素

发布日期:2017-04-24      浏览次数:712
   LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素
  LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素有进样器、检测器和连接管中的死体积。采用细内径的管路,尽量减小连接管路的长度,采用死体积小的检测器,采用合适的进样方式和技术,可降低柱外效应。
  一、采用细内径的管路,尽量减小连接管路的长度。
  若管路内径减小,其长度可增加。若管路内径增大,其长度要缩短。内径0.25mm连接管应为100mm左右或更短。内径0.5mm连接管,长度应在10mm以下。
  连接管内径减小,管内压力降较大,泵压会上升。
  二、采用死体积小的检测器。
  一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时,要求检测池体积小于14μL,一般为5~8μL。
  三、LC梯度色谱仪采用合适的进样方式和技术。
  进样有时是色谱峰展宽的主要原因,这取决于进样体积和进样方式。
  进样体积越大,柱外效应越大。
  进样方式一般有阀进样与注射器进样两种。阀进样允许进样体积大,注射进样允许进样体积小。进样体积还与溶质k值有关,溶质k值越大,允许进样的体积越大。
  LC梯度色谱仪不分流进样时,在气化室中气化的含有大量溶剂的样品不可能瞬间进入毛细管柱,溶剂峰会严重拖尾,使早流出组分的色谱峰被掩盖在溶剂拖尾峰中,从而使分析变得困难甚至不可能。这种由于进样时间延长引起的色谱峰展宽称为时间性谱带展宽。时间性谱带展宽可采用溶剂效应和热浓缩来抑制。
  所谓溶剂效应是指进祥时柱温比溶剂沸点低15~30℃,当不分流进样完毕后,打开分流阀,用载气吹扫气化室中残留的溶质和溶剂,同时柱温开始升高,溶剂开始蒸发,溶质以窄的起始谱带开始进行分离的过程。
  LC梯度色谱仪所谓热浓缩是指进样时柱温比溶质沸点低很多,使溶质冷凝在柱头上,同时柱温比溶剂沸点高很多,使溶剂保留为气态的过程。在此条件下不会出现溶剂效应。如果柱温比溶质沸点低150℃以上,热浓缩会有效地把溶质浓缩到很窄的区带上。
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